Сайт грм: Русский музей

  • 16.02.2020

Содержание

Часы работы — Русский музей

На информационных стойках музея в Михайловском дворце, корпусе Бенуа и Михайловском замке вы можете узнать о режиме работы музея, временных выставках, мероприятиях, лекциях, занятиях и концертах, проходящих в Русском музее.

Телефон для справок: +7 (812) 595-42-48

Михайловский дворец, корпус Бенуа     
Понедельник 10:00 — 20:00
Вторник выходной день
Среда 10:00 — 18:00
Четверг 13:00 — 21:00
Пятница 10:00 — 18:00
Суббота 10:00 — 18:00
Воскресенье 10:00 — 18:00
Кассы закрываются на полчаса раньше
Михайловский замок, Мраморный дворец, Строгановский дворец, Домик Петра I 
Понедельник 10:00 — 18:00
Вторник
выходной день
Среда 10:00 — 18:00
Четверг 13:00 — 21:00
Пятница 10:00 — 18:00
Суббота 10:00 — 18:00
Воскресенье 10:00 — 18:00

Кассы закрываются на полчаса раньше

Летний сад 
1 мая — 30 сентября 10:00 — 22:00
1 октября — 31 марта 10:00 — 20:00 
1 апреля — 30 апреля закрыт на просушку 
вторник Летний сад закрыт для проведения планового профилактического ухода за территорией и фонтанным комплексом

Вход закрывается на полчаса раньше

Михайловский сад   
1 мая — 30 сентября 10:00 — 22:00
1 октября — 31 марта 10:00 — 20:00
2 апреля — 30 апреля закрыт на просушку
Вход закрывается на полчаса раньше
  Летний дворец Петра I
Понедельник 11:00 — 19:00
Вторник выходной день
Среда 11:00 — 19:00
Четверг 11:00 — 19:00
Пятница 11:00 — 19:00
Суббота 11:00 — 19:00
Воскресенье 11:00 — 19:00
График работы отдела рукописей:

Приёмный день — среда, часы работы с 11. 00 до 17.00 (Перерыв 13.00 – 14.00)

Ежегодно отдел рукописей закрыт для посещения с 16 июля по 15 сентября

Электронная почта отдела рукописей[email protected] 



ГБОУ Российская гимназия при Государственном Русском музее Санкт-Петербурга

Уважаемые гимназисты, родители (законные представители), коллеги!
Приглашаем Вас принять участие во Всероссийском лыжном забеге.
06 февраля 2021 года Участники Всероссийского конкурса
для школьников «Большая перемена» – проекта президентской платформы «Россия – страна возможностей» – в рамках еженедельной акции «Добрая суббота» проведут Всероссийский лыжный забег.
Цель акции – познакомить школьников с волонтерской деятельностью, вовлечь в добровольческое движение в своем регионе.

Всероссийская лыжня «Большой перемены» стартует по всей стране
6 февраля в 11:00 по местному времени.
В акции смогут принять участие все школьники и их родители. Забег пройдет в формате эстафеты, которую передадут школьники Дальнего Востока и Сибири. Участники акции в г. Санкт-Петербурге передадут эстафету жителям Архангельской области.

Фото и видео своего участия во Всероссийской лыжне «Большой перемены» можно будет опубликовать в сообществе конкурса «Большая перемена» ВКонтакте https://vk.com/bpcontest и в своих социальных сетях

с хэштегами #ДобраяСуббота #БольшаяПеремена

Дистанция трассы в рамках забега может быть произвольной
в зависимости от общей физической подготовки участников забега. Рекомендованная дистанция: от 100 метров. Участники с хроническими заболеваниями и ограничениями по занятию физической культурой и спортом не должны быть допущены к участию в акции.
К участию в забеге приглашаются семейные команды, а также команды численностью от 10 человек.
Участникам забега необходимо сделать фото и видео, на которых необходимо передать эстафету другому региону (Архангельской области), а также опубликовать пост
в социальных сетях с хэштегами: #ВставайНаЛыжи #ДобраяСуббота #БольшаяПеремена.

Передача эстафеты: участники забега передают эстафету в соответствии со схемой.

Схема находится по ссылке: https://clck.ru/T6gYm

Обязательный атрибуты забега: спортивная одежда, беговые лыжи, флаг или плакат #БольшаяПеремена.

Участие в мероприятиях проекта «Добрая суббота» для детей является добровольным.

Отзывы о ремнях ГРМ Bosch: Оценки, Рейтинги, Сайт, Страна

Что мы знаем о ремнях ГРМ Bosch

Бренд производителя зарегистрирован в стране — Германия. Официальный сайт находится по адресу: http://www.bosch.ru.

В июне 2021 на PartReview сложилось неоднозначное мнение о ремнях ГРМ Bosch.

Оценка PR — 70 из 100, базируется на основе 39 отзывов и 124 голосов. 26 отзывов имеют положительную оценку, 3 — нейтральную, и 10 — отрицательную. Средняя оценка отзывов — 3.5 (из 5). Голоса распределились так: 88 — за, 36 — против.

В рейтинге лучших производителей ремней ГРМ запчасть занимает 4 позицию, уступая таким производителям как Contitech и Gates , но опережая ремни ГРМ SUN и БРТ.

Пользователи также составили мнение о качествах ремней ГРМ Bosch:

  1. Долговечность — сохранение работоспособности на протяжении заявленного срока — оценивается позитивно. 3.8 балла из 5.
  2. Свист — склонность производить свист и другие подобные звуки — оценивается позитивно. 4.6 балла из 5.

Ремень ГРМ Bosch в авторейтингах

Здесь можно узнать владельцы каких марок и моделей ставили ремни ГРМ Bosch на свои авто. Далее список авторейтингов, в которых данная запчасть входит в ТОП-3 лучших:

  1. Bosch на первом месте в авторейтинге ремней ГРМ для: Subaru Forester, Toyota Corolla, Chevrolet Lanos .
  2. Bosch на втором месте в авторейтинге ремней ГРМ для: Kia Spectra, Suzuki Escudo, ВАЗ (Lada) 2113/2114/2115, Mazda Familia, Volkswagen Bora .
  3. Bosch на третьем месте в авторейтинге ремней ГРМ для: ВАЗ (Lada) Kalina, ВАЗ (Lada) 2108/2109, ВАЗ (Lada) Priora, Chevrolet Cruze .

Ремень ГРМ Bosch в сравнении

На PartReview доступны 9 сравнений ремней ГРМ Bosch c другими производителями.

В частности можно выяснить, чьи ремни ГРМ лучше: Bosch или BANDO, Bosch или DONGIL, Bosch или БРТ, Bosch или INA, Bosch или Mitsuboshi .

Замена ремня ГРМ Лада Калина 8 клапанов подробная инструкция

Замена ремня ГРМ Лада Калина 8 клапанов относительно несложная операция, по крайней мере здесь все гораздо прочем чем с версией двигателя с 16-ю клапанами. Но все же работа потребует от вас внимательности и аккуратности. На Lada Kalina с 8-клапанным мотором менять ремень по данным завода изготовителя требуется раз в 75 тысяч километров. Обрыв ремня приводит к загибанию клапанов. А гнутые клапана, это дорогостоящий ремонт всего двигателя, поэтому игнорировать процедуру не стоит. Проверку ремня необходимо проводить раз в 15 тысяч километров. Если вы обнаружите дефекты или масло на ремне, то его необходимо менять незамедлительно.

Схема привода ГРМ Лада Калина

.

  • 1 — зубчатый шкив коленчатого вала
  • 2 — зубчатый шкив насоса охлаждающей жидкости
  • 3 — натяжной ролик
  • 4 — задняя защитная крышка
  • 5 — зубчатый шкив распределительного вала
  • 6 — зубчатый ремень ГРМ
  • А — прилив на задней защитной крышке
  • В — метка на шкиве распределительного вала
  • С — метка на крышке масляного насоса
  • D — метка на шкиве коленчатого вала.

Для замены ремня привода газораспределительного механизма нам следует демонтировать ремень привода генератора или ремень привода вспомогательных агрегатов для Калины с кондиционером.

Шестигранником «на 5» отворачиваем четыре винта крепления передней верхней крышки привода ГРМ и снимаем пластиковый кожух.

Во избежание повреждения датчика положения коленчатого вала необходимо снять и его. При выключенном зажигании отжимаем фиксатор колодки жгута проводов и отсоединяем колодку от разъема датчика. Головкой «на 10» отворачиваем болт крепления датчика.

Вынимаем датчик из отверстия прилива крышки масляного насоса и откладываем его на место, где нет стальных опилок, могущих впоследствии нарушить работу датчика.

Перед демонтажем ремня необходимо проверить фазы газораспределения двигателя — установить поршень 1-го цилиндра в положение ВМТ (верхней мертвой точки) такта сжатия. Головкой «на 17» проворачиваем коленчатый вал по часовой стрелке за болт крепления шкива привода генератора до момента совмещения метки 1 на зубчатом шкиве распределительного вала с приливом 2 на задней крышке привода ГРМ.

Чтобы убедиться в правильном положении коленчатого вала, вынимаем резиновую заглушку смотрового окна в верхней части картера сцепления. Риска 2 на маховике должна располагаться напротив прорези 1 шкалы которая видна в окне крышки картера сцепления.

Перед отворачиванием болта крепления шкива привода генератора просим помощника зафиксировать коленчатый вал от проворачивания, вставив через окно в картере сцепления отвертку между зубьями маховика.

Головкой «на 17» отворачиваем болт крепления шкива привода генератора снимаем шкив и шайбу.

Шестигранником «на 5» отворачиваем три винта крепления передней нижней крышки привода ГРМ. Снимаем крышку.

Накидным ключом «на 15» ослабляем затяжку болта крепления натяжного ролика.

При этом натяжной ролик повернется и натяжение ремня ослабнет. Снимаем ремень привода ГРМ со шкивов коленчатого и распределительного валов. Вынимаем ремень из моторного отсека.

Внимание! После снятия ремня привода ГРМ нельзя проворачивать коленчатый и распределительный валы во избежание утыкания поршней в клапаны. Размеры зубчатого ремня привода ГРМ Lada Kalina с двигателем 8 клапанов – ширина 17 мм, число зубьев 113.

Для снятия натяжного ролика ремня ГРМ отворачиваем болт его крепления и снимаем натяжной ролик вместе с болтом.

Вращаем пластмассовую обойму ролика, удерживая его за эксцентрик. Ролик должен вращаться бесшумно, равномерно и без заеданий. В противном случае ролик необходимо заменить.

Заодно можно проверить исправность насоса охлаждающей жидкости, покрутив и покачав его за шкив. Устанавливаем натяжной ролик на место, окончательно не затягивая болт его крепления. Для разных модификаций двигателя в головке блока цилиндров выполнены два резьбовых отверстия под болт крепления натяжного ролика. Болт крепления ролика вворачиваем в верхнее отверстие головки блока цилиндров. На фото ниже отверстие обозначено красной стрелкой.

Устанавливаем ремень привода ГРМ в обратной последовательности. Перед установкой ремня убеждаемся в совмещении установочных меток коленчатого и распределительного валов. Надеваем ремень на зубчатый шкив коленчатого вала, затем натягивая обе ветви ремня, надеваем заднюю ветвь на шкив насоса охлаждающей жидкости и заводим ее за натяжной ролик, а переднюю — надеваем на шкив распределительного вала.

При необходимости доворачиваем шкив распределительного вала в сторону наименьшего хода до совпадения зубьев ремня с впадинами шкива. Для натяжения ремня необходимо повернуть натяжной ролик против часовой стрелки. Для этого вставляем в пазы наружного диска ролика стержни (диаметр 4 мм, расстояние между стержнями 18 мм) специального ключа (для наглядности показано на снятом ролике).

Такой ключ использовался при регулировке натяжения ремня во всех переднеприводных ВАЗах, купить его можно в любом магазине автозапчастей.

Также для регулировки натяжения ремня ГРМ Лада Калина можно использовать щипцы для снятия стопорных колец. Натягиваем ремень, поворачивая натяжной ролик ремня против часовой стрелки до момента совпадения выреза наружного диска ролика с прямоугольным выступом его внутренней втулки, и затягиваем болт крепления ролика моментом 34–41 Нм.

Чрезмерное натяжение ремня снижает срок его службы, а также срок службы подшипников насоса охлаждающей жидкости и натяжного ролика. Недостаточное натяжение ремня тоже приводит к его преждевременному выходу из строя и может вызвать нарушение фаз газораспределения. Проворачиваем коленчатый вал на два оборота по часовой стрелке. Проверяем натяжение ремня и совпадение установочных меток коленчатого и распределительного валов. При снятом шкиве привода генератора правильное положение коленчатого вала удобно контролировать по совмещению метки 1 на зубчатом шкиве коленчатого вала с ребром 2 крышки масляного насоса. Фото для наглядности далее.

Если в не уверены в своих силах, то можете доверить работу по замене ремня на Лада Калина автосервису. Для двигателя с 8-клапанным механизмом ГРМ это выходит дешевле, чем для версии с 16 клапанным мотором.

progress-motor

Уважаемые посетители!

Рады приветствовать Вас на сайте Компании Прогресс! 

 

      Мы занимаемся решением проблем, связанных с эксплуатацией автомашин марок ГАЗ, УАЗ.

      Ни для кого не секрет, что купить запчасти в наше время можно без труда. А купить инновационный продукт, который совместит в себе качество, надёжность, характеристики, заложенные конструкторами, а не то, что мы получаем на выходе с конвейера, уже совсем непросто. При этом ещё, чтобы устраивало соотношение цена-качество, скажем, очень нелегко. Мы можем смело заявить: Компания Прогресс решает все эти задачи!

 

      Мы занимаемся производством уже с 2003 года и,как производители, несём все гарантийные обязательства за свою продукцию. Ведь собственное производство — это что? Это:

— способность вносить изменения и контролировать процесс выпуска продукции;

— своевременно реагировать и улучшать характеристики товара;

— знать и иметь возможность менять технологический процесс;

— возможность полного контроля качества выпускаемой продукции, а также ценообразования.

 

       Вкупе с опытом и профессионализмом наших сотрудников, мы достигли высоких результатов не только в производстве качественных запчастей, но и обеспечили необходимой информационной поддержкой наших покупателей. Всю информацию о товаре Вы можете прочитать в карточке товара (его описании). Про разработанные Компанией Прогресс инновационные внедрения можно узнать в разделе Новости, об установке — в разделе Видео, а отзывы тех, кто уже приобрёл и эксплуатирует — в нашей Группе социальной сети «В Контакте».

 

       Мы доставляем товар по всей территории России и ближнего зарубежья. Если Вы не нашли продукцию Компании Прогресс в магазинах Вашего города, то всегда можете заказать её в каталоге на нашем сайте. После отправки заказа наш менеджер свяжется с Вами и обсудит способ доставки и оплаты, удобный Вам.

 

График работы Компании Прогресс: понедельник-пятница 8.00 — 17.00 (время московское), суббота, воскресенье — выходные

 

Мы рады работать для Вас!    Удачи на дорогах!  

1С автоматизация бухгалтерского, управленческого, налогового учета в Москве и по всей России.

Мы свяжемся с Вами в ближайшие 10 минут.
Наши специалисты позвонят Вам с 09:00 до 18:00 по московскому времени в будние дни.

Имя* Телефон* Комментарий Эл. почта

* — обязательные поля

Отправляя эту форму, Вы соглашаетесь с Политикой конфиденциальности и даете согласие на обработку персональных данных компанией «1С-Рарус».

Дикон Авто — Автозапчасти, Автосервис, StarLine. Ярославль Иваново Рыбинск

Немного о наших ТЦ

Подробнее о наших ТЦ

Каждый водитель хочет сделать свой автомобиль наиболее комфортным и безопасным. Для этого необходимо поддерживать машину в рабочем состоянии, проходить техосмотр, менять запчасти, масло, расходники. А для собственного удобства всегда можно установить современную электронику и подобрать аксессуары в салон, подходящие для любого времени года.

Очень удобно приобретать все необходимые автотовары в одном магазине, в котором и качество высокое, и цены вполне приемлемые. Где его найти? Сеть торговых центров «Дикон Авто» в Ярославле, Иванове и Рыбинске — как раз то, что вам нужно. Широкий выбор позволит найти все самое необходимое и избавит от длительного и утомительного поиска по магазинам и на многочисленных веб-сайтах. Достаточно посоветоваться с продавцом и выбрать подходящие автозапчасти, электронику, автосвет, автохимию и аксессуары. 

В каталоге представлены товары для отечественных и зарубежных машин, все они отличаются высоким качеством и закупаются только у надежных производителей. Именно поэтому магазин «Дикон Авто» дает расширенную гарантию на реализуемую продукцию. В сети торговых центров действуют скидки и акции, следить за которыми очень удобно через наш сайт. На его страницах вы найдете подробную информацию о компании, сотрудниках, предоставляемых услугах и станциях технического обслуживания.

Кроме Ярославля, вы найдете нас в ближайших городах. Торговые центры «Дикон Авто» расположены в Иваново и Рыбинске, там вы также найдете все необходимое для вашей машины. Не важно, проездом вы или постоянно живете в одном из этих городов, вы всегда можете заехать в любимый магазин автотоваров. Гибкая система скидок, акции, услуги персонального менеджера — все это сделает ваш поход в торговый центр комфортным и не отнимет много личного времени. Приходите к нам, и вы поймете, что сервис на самом высоком уровне возможен!

Адреса «Дикон Авто» Рыбинска, Иваново и Ярославля вы узнаете на сайте. Просто выберите свой город из списка, и вам откроется вся необходимая информация: часы работы, адреса ТЦ, каталоги. Задать вопросы можно консультанту на сайте или менеджеру отдела, они хорошо ориентируются в категориях товаров и всегда помогут вам. 

Интернет-магазин автозапчастей Дикон Авто

Найти необходимые запчасти на нашем сайте магазина «Дикон Авто» очень просто: достаточно зайти на сайт и ввести номер детали или номер VIN. Автоматизированная система покажет, что есть в наличии в вашем городе. Другой вариант — выберите марку отечественного или зарубежного автомобиля, найдите конкретную модель и тип запчастей. Результат быстро высветится на экране — есть ли детали в наличии и сколько.

Современный и удобный интернет-магазин автозапчастей поможет вам сэкономить немало времени. Заходите на сайт в любой удобный момент и выбирайте все, что вам необходимо. Добавив товар в корзину, вы можете сразу же оформить заказ — оплата проводится онлайн по банковской карте, либо в самом магазине. Если же у вас есть вопросы, то задать их можно через чат или по телефону. Менеджер расскажет вам подробно о каждой услуге, системе поиска по каталогу и оплате заказа. Также он сориентирует по наличию автозапчастей в торговом центре вашего города.

«Дикон Авто» — интернет-магазин, в котором вы найдете все, что необходимо для ремонта машины, обновления дизайна, повышения комфорта в салоне. Все единицы каталога имеют подробное описание, по которому вы подберёте подходящую электронику, аксессуары в салон и для оформления дизайна машины, автохимию на любой сезон. А если вы хотите сэкономить, обратите внимание на акции компании и особые условия для постоянных клиентов. 

Каталог «Дикон Авто»

Выбрать подходящий товар бывает довольно сложно, особенно когда вокруг очень много предложений. Если вы запутались в ассортименте или не нашли то, что искали, на помощь придет форма обратной связи сайта «Дикон Авто». Укажите, что именно вам необходимо, оставьте свои контактные данные, и мы подберем вам аналоги.

Широкий ассортимент и очень привлекательные цены не позволят вам уйти из магазина с пустыми руками. Очень просто подобрать автохимию, аксессуары для салона, электронику в машину. Вы найдете здесь антирадар, бортовой компьютер, акустическую систему, лампы для фар, сможете купить автозапчасти и аксессуары, полный перечень которых представлен на официальном сайте компании.

Мы разработали удобный каталог, в котором весь ассортимент разделен на категории. Если вы не знаете, где найти нужную деталь, вы всегда можете задать вопрос консультанту в чате или написать название товара в поисковую строку. Мы регулярно обновляем ассортимент, в том числе поставляем актуальную в конкретном сезоне продукцию, поэтому в «Дикон Авто» каталог в разное время года немного меняется. Обратите внимание на акции, скидки и выгодные предложения, которые непременно вас заинтересуют!

Процесс загрузки страницы | Документация New Relic

В этом документе объясняется:

  • Как загружается веб-страница
  • Как мониторинг браузера измеряет время загрузки страницы, также известный как мониторинг реального пользователя (RUM)

Процесс загрузки страницы

Вот основные шаги в загрузка большинства веб-страниц. Цифры 1-6 на схеме соответствуют пронумерованным шагам ниже.

График загрузки страницы: Шаги загрузки веб-страницы.Диаграммы мониторинга браузера отображают следующие сегменты этого процесса: Сеть , веб-приложение , обработка DOM и рендеринг страницы .

  1. Загрузка страницы начинается, когда пользователь выбирает гиперссылку, отправляет форму или вводит URL-адрес в браузере. Это также называется начальным запросом или началом навигации . Действие пользователя отправляет запрос по сети на сервер веб-приложений.
  2. Запрос поступает в приложение для обработки. (Для начала обработки запроса может потребоваться некоторое время. Это может быть результатом постановки запросов в очередь или других факторов.)
  3. Приложение завершает обработку и отправляет ответ HTML обратно по сети пользователю браузер. Иногда это называется , начало ответа или первый байт .
  4. Браузер пользователя получает ответ HTML и начинает обрабатывать объектную модель документа или DOM .
  5. DOM завершает загрузку; эта точка известна как DOM ready . Используя DOM, браузер пользователя начинает отображать страницу.
  6. Страница завершает рендеринг в браузере пользователя, и возникает событие загрузки окна . (Для страниц, которые используют асинхронную загрузку, некоторые элементы могут продолжать загружаться после события загрузки окна.)

Диаграммы времени загрузки страницы в мониторинге браузера

Мониторинг браузера фиксирует основные сегменты времени загрузки страницы на странице браузера Сводка а страница просматривает страницу .Если у вас включен мониторинг SPA, у вас будет доступ как к этой диаграмме, так и к диаграммам, относящимся к SPA. Диаграммы показывают:

  • Сеть
  • Время веб-приложения
  • Обработка DOM
  • Визуализация страницы
  • Другие применимые сегменты, например, очередь запросов

Цвета диаграммы соответствуют цветам на временной диаграмме загрузки страницы.

one.newrelic.com> Браузер> (выберите приложение)> Сводка : диаграмма времени загрузки отображается на странице Сводка и , просмотры страницы .

Способ, которым браузер собирает это время, зависит от способности браузера использовать API спецификации времени навигации. Вы можете добавить пользовательские события времени загрузки страницы с помощью API агента браузера.

Вот описания действий, включенных в сегменты диаграммы времени загрузки браузера:

Веб-приложение

Время веб-приложения включает время, проведенное на сервере приложений. Это можно определить только в том случае, если инструментарий браузера для времени загрузки страницы был предоставлен агентом APM.

Сеть

Сетевой уровень включает время, затрачиваемое на перенаправления, а также на запрос и получение HTML. Он не включает время на сервере или статические активы.

Измерение сетевого времени начинается с первого щелчка по ссылке. Сетевое время включает в себя DNS и может включать более одного поиска, если у вас есть перенаправления на вашем сайте, TCP (включая брандмауэр, если вы не настроили мониторинг времени очереди запросов) и время соединения SSL.

  • Если у вас настроен мониторинг времени очереди запросов, то сетевое время не включает время очереди запросов, которое происходит после заголовка X-Request.

  • Если у вас не настроен мониторинг времени очереди запросов, то сетевое время не включает ли все время очереди запросов.

    API спецификации времени навигации предоставляет подробную разбивку сетевого времени. (Для старых браузеров таймер запускается по «событию перед выгрузкой».)

    Для приложений, которые были развернуты с использованием метода копирования / вставки, браузер включает веб-приложение и время ожидания в сетевом времени. Это связано с тем, что браузер полагается на серверного агента для передачи значений приложения агенту браузера посредством автоматической инъекции.

    Для получения дополнительной информации о том, как это внутреннее время разбивается с точки зрения браузера, используйте страницу Session traces . Трассировка сеанса сообщает обо всех доступных сетевых событиях, поэтому вы можете видеть в каждом конкретном случае, как браузер тратит время на поиск DNS и другие сетевые события.

    Важно

    Даже при настроенной очереди запросов настройка внешнего сервера все еще может влиять на сетевое время. Это связано с тем, что интерфейсный сервер не добавляет заголовок времени ожидания в очереди до тех пор, пока он не примет и не обработает запрос.Если интерфейсный сервер настроен таким образом, что запросы запускают бэклог и помещаются в очередь в сокете прослушивателя, который интерфейсный сервер использует для приема подключений, тогда вы увидите увеличение сетевого времени для мониторинга браузера. Заголовки времени ожидания в очереди никогда не могут учитывать отставание в этом сокете прослушивателя.

Обработка DOM

Обработка DOM — это время, необходимое для синтаксического анализа HTML в DOM и получения или выполнения синхронных сценариев. Если браузер начинает загружать изображения на этом этапе, время загрузки страницы будет фиксировать время загрузки изображения.

Слои обработки DOM и отрисовки страницы включают сетевое время для статических ресурсов (ресурсов, которые не извлекаются явно после загрузки страницы). Однако, если сценарий на странице динамически вставляет теги изображений и загружает изображения после завершения работы сервера или системы доставки контента (CDN), время загрузки страницы не может фиксировать время загрузки изображения.

Отрисовка страницы

Фаза отрисовки страницы — это время между завершением DOM и событием загрузки окна. На этом этапе измеряется обработка содержимого страницы на стороне браузера и часто включается время загрузки скриптов и статических ресурсов.

Очередь запросов

Очередь запросов будет отображаться на графике времени загрузки, если к вашей учетной записи привязаны браузер и APM. В New Relic под очередью запросов понимается время между запросом, поступающим в ваши производственные системы, и его достижением в вашем приложении. В зависимости от специфики вашей производственной инфраструктуры это время может включать фактическую очередь, в которую входят запросы, или может представлять другие функции, требующие времени (например, балансировка нагрузки или задержка внутренней сети).

Запросы сервера приложений и транзакции браузера

Часто количество транзакций сервера приложений (запросов в минуту или об / мин ) превышает количество транзакций браузера (страниц в минуту или ppm ) для одного и того же приложения. Для получения дополнительной информации см. Процедуры устранения неполадок.

Выбросы

Независимо от того, насколько хорошо работает ваше приложение, будут медленные браузеры, платформы и сети, из-за которых общее время отклика будет казаться медленнее.Чтобы свести к минимуму перекос, вызванный выбросами, время загрузки страницы ограничивает и масштабирует время ответа конечного пользователя, которое больше чем в 4,5 раза превышает значение Apdex T вашего приложения, до 4,5 раза Apdex T или до 13,5 секунд, в зависимости от того, что больше. (Выбросы гистограммы отсекаются на 95%.)

Например, если пороговое значение Apdex T для конечного пользователя вашего приложения составляет 8 секунд, то время отклика будет ограничено 36 секундами. Это сводит к минимуму влияние времени отклика на ваше приложение в целом, но по-прежнему обеспечивает учет «неудовлетворительных» оценок Apdex.

Для мониторинга SPA выбросы обрабатываются иначе. Когда продолжительность начальной загрузки страницы или изменения маршрута достигает 30 минут, это событие обрабатывается как недопустимые данные и отбрасывается.

Для получения дополнительной помощи

Дополнительные ресурсы документации включают:

On The Mark Timing

On The Mark Сроки

Справа показаны изображения, показывающие прогресс в технологии камеры, которую мы использовали, начиная с черно-белой камеры, технологии SCSI, на компьютере Macintosh.Времена изменились!

On The Mark Timing направлен на то, чтобы облегчить стресс у руководителей соревнований, предоставляя хорошо обученных операторов, хорошо обслуживаемое оборудование и готовность слушать, чтобы у вас было мероприятие, которое соответствует вашим ожиданиям от .

Основано в 1996 году двумя школьными тренерами по легкой атлетике, которые понимали важность организации соревнований по легкой атлетике. Система хронометража FinishLynx находилась на начальной стадии. Цифровые технологии были будущим и логическим переходом от фотофинишной пленки AccuTrack.

Мы прошли долгий путь от нашей одной камеры (черно-белой), одной компьютерной системы с технологией SCSI. Теперь мы поставляем две независимые цветные камеры (основная и резервная) FinishLynx со встроенным программным обеспечением для управления данными, ветромером, цифровыми часами и / или видеоплатой размером 1 х 2 метра.

Наше видение — предоставить не только надежную и точную службу хронометража, но и информационную систему, которая позволяет заинтересованным зрителям в любом месте видеть результат по ходу соревнований.Мы хотим услышать от руководства встречи: «Мы не беспокоились о сроках и результатах».

Из нашего дома в центральном Огайо мы обеспечиваем управление хронометражем и данными для всех уровней легкой атлетики и соревнований по пересеченной местности на Среднем Западе. Мы предоставляли услуги колледжу, старшей школе, USATF-JO, AAU и молодежной программе Hershey. Наш сервис предоставил информацию о времени проведения чемпионатов NCAA III в закрытых помещениях в 2007, 2009-2011 годах и чемпионатов на открытом воздухе в 2011 году.

Нажмите кнопку услуг, чтобы просмотреть оборудование и прочитать описание работы нашей системы. Если вы считаете, что мы можем вам помочь, свяжитесь с нами. Мы хотим облегчить работу менеджерам по встречам.

Прочтите о первых днях существования F.A.T. в статье Sports Illustrated 1957 года. SI 2.11.1957

Посмотрите отличное видео на YouTube 2010 года о том, как работает фотофиниш. Объяснение отделки фото

Navigation Timing API — веб-API

Navigation Timing API предоставляет данные, которые можно использовать для измерения производительности веб-сайта.В отличие от библиотек на основе JavaScript, которые исторически использовались для сбора аналогичной информации, Navigation Timing API может быть гораздо более точным и надежным.

В данной статье описан уровень синхронизации навигации 1. Существует спецификация для уровня 2, но она здесь еще не описана.

API синхронизации навигации можно использовать для сбора данных о производительности на стороне клиента, которые затем можно передать на сервер с помощью XMLHttpRequest или других методов.

Этот API позволяет измерять данные, которые ранее было трудно получить, например количество времени, необходимое для выгрузки предыдущей страницы, сколько времени занимает поиск домена, общее время, затраченное на выполнение обработчика load окна и т. Д.

Производительность
Свойство window.performance возвращает объект Performance . Хотя этот интерфейс определяется API времени высокого разрешения, API синхронизации навигации добавляет два свойства: тайминг и навигация из следующих типов.
PerformanceNavigationTiming
Предоставляет методы и свойства для хранения и извлечения показателей, касающихся событий навигации по документу браузера. Например, этот интерфейс можно использовать для определения времени, необходимого для загрузки или выгрузки документа.
Время работы
Используемый в качестве типа для значения тайминга , объекты этого типа содержат информацию о времени, которая может дать представление о производительности веб-страницы.
PerformanceNavigation
Тип, используемый для возврата значения навигации , которое содержит информацию, объясняющую контекст операции загрузки, описанной этим экземпляром Performance .

API синхронизации навигации можно использовать для сбора данных о производительности на стороне клиента для отправки на сервер через XHR, а также для измерения данных, которые было очень трудно измерить другими способами, такими как время выгрузки предыдущей страницы, просмотр домена время работы, окно .onload общее время и т. д.

Вычислить общее время загрузки страницы

Чтобы вычислить общее время, затраченное на загрузку страницы, вы можете использовать следующий код:

  const perfData = window. performance.timing;
const pageLoadTime = perfData.loadEventEnd - perfData.navigationStart;
  

Это вычитает время начала навигации ( navigationStart ) из ​​момента, когда обработчик событий загрузки load возвращает ( loadEventEnd ).Это дает вам предполагаемое время загрузки страницы.

Расчет времени ответа на запрос

Вы можете рассчитать время, прошедшее между началом запроса и завершением получения ответа, используя следующий код:

  const connectTime = perfData.responseEnd - perfData.requestStart;  

Здесь время, в которое был инициирован запрос ( requestStart ). с момента окончания приема ответа ( responseEnd ).

Рассчитать время рендеринга страницы

В качестве еще одного примера интересного фрагмента данных, который вы можете получить с помощью Navigation Timing API, который иначе получить нелегко, вы можете получить количество времени, которое потребовалось для рендеринга страницы:

  const renderTime = perfData. domComplete - perfData.domLoading;  

Это получается, начиная с момента завершения загрузки DOM и его зависимостей ( domComplete ) и вычитая из него время начала синтаксического анализа DOM ( domLoading ).

Window.performance.timing

Таблицы BCD загружаются только в браузере

Отчет о времени страницы | Справочный центр Piwik PRO

Отчет о времени загрузки страниц позволяет вам проверить, насколько быстро ваш веб-сайт загружается в браузере посетителя. Это важный отчет для ваших разработчиков, которые знают, как работать с вашим сайтом.

В этом отчете вы увидите четыре раздела:

  • URL страницы : помогает увидеть, какие страницы загружаются быстро и медленно.Вы можете обнаружить, что конкретная целевая страница показывает низкую скорость загрузки и работает на этой странице или перенаправляет ее на целевую страницу, которая работает лучше.
  • Местоположение : используется для определения областей, в которых ваш веб-сайт загружается значительно медленнее. Вы можете узнать, что целевая аудитория проживает в районе с плохим подключением к Интернету, и эта область отображается в отчете о местах с большим временем загрузки. Зная, что вы можете работать над подготовкой оптимизированной версии своего веб-сайта или целевых страниц и поддерживать интерес аудитории к вашему сайту.
  • Устройство : помогает увидеть скорость загрузки вашего веб-сайта на разных устройствах и определить, есть ли проблемы на каком-либо из них. Вы можете заметить, что ваш сайт медленно загружается, например, на Android, и предпринять шаги по его оптимизации для этого типа устройств.
  • Браузер : помогает обнаруживать проблемы, которые могут возникнуть в различных браузерах. Вы можете увидеть, что группа посетителей при использовании, например, Safari, загружается медленно. Зная, что вы можете изменить дизайн своего сайта так, чтобы он был создан для этого браузера.

Чтобы просмотреть отчет, выполните следующие действия:

  1. Перейти в меню > Аналитика (новый) .
  2. Перейдите к Отчеты .
  3. Слева щелкните Время страниц .
  4. Просмотреть отчет.
  5. Чтобы получить доступ к определенным разделам отчета, щелкните имя раздела.
  6. Кроме того, всякий раз, когда вы видите вложенное измерение в отчете, вы можете щелкнуть его, чтобы глубже изучить данные.

Показатели в отчете

В отчете о времени загрузки страницы вы найдете следующие показатели:

  • Время взаимодействия : время от запроса пользователя (например, щелчка по ссылке или отправке URL-адреса в браузере) до момента, когда содержимое страницы и основные сценарии загружаются и пользователь может взаимодействовать со страницей. Это общее время транзакции между клиентом и сервером.
  • Время перенаправления : общее время одного или нескольких перенаправлений, которые произошли.Транзакции, не имеющие перенаправления HTTP, не учитываются при расчете среднего значения.
  • Время поиска домена : время, необходимое для определения IP-адреса сервера.
  • Время соединения с сервером : время, необходимое для установления соединения с веб-сервером.
  • Время ответа сервера : время, необходимое для получения первого байта ответа от сервера на запрос браузера.
  • Время до готовности DOM : Время, затраченное на обработку HTML и CSS документа страницы.
  • Время рендеринга страницы : время, необходимое для создания дерева рендеринга, макета и, наконец, отрисовки веб-сайта в браузере.

Усиленная гомологически управляемая инженерия генома человека за счет контролируемого времени доставки CRISPR / Cas9

Рецензент № 1:

Система CRISPR / Cas9 в настоящее время является широко используемой системой для сайт-ориентированного редактирования генома. При сайт-направленном расщеплении белком CRISPR / Cas9, управляемым РНК, вводится двухцепочечный разрыв (DSB). DSB может быть запломбирован либо с помощью склонного к ошибкам негомологичного соединения концов (NHEJ), либо путем гомологически-направленной репарации (HDR). Обычно NHEJ в значительной степени предпочитается в клетках, и поэтому интеграция желаемой ДНК в заданное место генома с помощью HDR является труднодостижимой. Соответственно, в прошлом люди пытались определить экспериментальные параметры, которые можно изменить, чтобы повысить эффективность HDR .

Рецензируемая статья очень хорошо написана, а рисунки хорошо продуманы и понятны.Однако в разделе результатов этой статьи содержится много цифр. Возможно, авторы смогут выделить разделы, в которых они могут сделать общие утверждения, а не просто перечислить все точки данных. Текст в его нынешнем виде трудно читать из-за чрезмерного перечисления данных .

Мы согласны с рецензентом в том, что чрезмерное перечисление числовых данных затрудняет чтение, и теперь уточнили рукопись, удалив несколько списков данных и сохранив только те числа, которые необходимы для обсуждения.

Рецензируемая рукопись посвящена оптимизации экспериментальных параметров CRISPR / Cas9-опосредованного редактирования генома в клетках человека для достижения более высоких частот HDR. Авторы пользуются тем фактом, что соотношение HDR и NHEJ различается в разных клеточных циклах. Они используют набор химикатов, которые вызывают остановку в определенных клеточных циклах. Как упоминалось авторами, эта идея использовалась ранее в комбинации с нуклеазами на основе TAL-эффекторов (TALEN) (Rivera-Torres, 2014, PLoS ONE 9: e96483).Однако кажется, что TALEN менее эффективны в сочетании с химическими веществами, останавливающими клеточный цикл, такими как нуклеазы CRISPR / Cas9. Мнение авторов кажется правильным. Тем не менее, факт остается фактом: концептуальная идея не нова, но была опубликована до года.

В дополнение к использованию химикатов, останавливающих клеточный цикл, авторы протестировали другие экспериментальные параметры (например, концентрацию CRISPR / Cas9, направляющую РНК и длину матрицы репарации HDR) для повышения эффективности HDR. В своих исследованиях они определяют различные параметры, такие как концентрация CRISPR / Cas9, которые значительно повышают эффективность HDR. Они также предоставляют данные, указывающие на то, что экспериментальные условия, улучшающие HDR, не вызывают повышенной активности вне цели. Я считаю, что выявленные экспериментальные условия будут полезны огромному сообществу ученых, которые хотят использовать систему CRISPR / Cas9 для HDR в человеческих клетках. Тем не менее, хотя улучшения обычно значительны, в большинстве случаев они остаются незначительными.Кроме того, авторы не проверяли, будут ли используемые химические вещества иметь нежелательные побочные эффекты (например, высокая общая частота мутаций, повышенная частота гибели клеток и т. Д.). Я предполагаю, что клеточные последствия, связанные с использованием этих химикатов, во многих случаях известны и, следовательно, должны быть проверены экспериментально. По крайней мере, влияние на жизнеспособность обработанных клеток должно быть несложным. Я убежден, что эти исследования увеличат ценность исследований .

Мы благодарим рецензента за критическую оценку нашей работы и ценим возможность побочных эффектов при использовании ингибиторов клеточного цикла.Во-первых, мы хотели бы подчеркнуть, что повышение эффективности редактирования не является незначительным. Мы решили представить прямую меру% HDR, которая ограничена 100%, вместо того, чтобы преобразовывать процентное значение в процентное увеличение. Хотя в некоторых случаях улучшение может показаться скромным, эти изменения в% HDR могут иметь существенное значение при принятии решения о продолжении выделения отдельных клеток для получения гомозиготных клонов.

Во-вторых, теперь мы включаем анализ клеточного цикла клеток HEK293T, фибробластов и hES-клеток после высвобождения из ингибиторов клеточного цикла (рисунок 1 — рисунок в приложении 1).Во всех случаях синхронизированные клетки быстро возвращаются к нормальному клеточному циклу. Жизнеспособность синхронизированных hES-клеток по сравнению с несинхронизированными клетками при пассировании и нуклеофекции была сопоставима при субкультивировании с высокой плотностью, тогда как жизнеспособность снижалась при субкультивировании с низкой плотностью. Для выживания синхронизированных клеток, субкультивированных при низкой плотности клеток, требовался ингибитор апоптоза ROCK. Важно отметить, что колонии hES, которые сформировались из синхронизированных культур, не имели видимых изменений в морфологии колоний; все колонии экспрессировали высокие уровни щелочной фосфатазы, маркера плюрипотентности.

Рецензент № 2:

Система CRISPR / Cas9 быстро революционизирует область геномной инженерии, позволяя исследователям произвольно манипулировать как кодирующими, так и некодирующими геномными последовательностями в постоянно растущем числе биологических систем. Эта система создает двухцепочечные разрывы (DSB) в целевых локусах, которые могут быть восстановлены с помощью одного из двух клеточных механизмов: негомологичного соединения концов (NHEJ) или гомологически-направленной репарации (HDR). Способность клетки восстанавливать DSB, генерируемую Cas9, посредством HDR-опосредованного включения экзогенных ДНК-матриц, недавно была использована для создания нескольких модификаций эндогенных локусов, таких как новые нокаутные аллели, точечные мутации и флуоресцентные метки, среди прочего. Однако частота NHEJ обычно выше, чем HDR из-за того, что NHEJ не требует каких-либо гомологичных или экзогенных молекул ДНК для восстановления DSB. Поэтому разработка экспериментальных методов, которые увеличивают частоту HDR, важна для того, чтобы эта технология полностью раскрыла свой потенциал в различных лабораторных исследованиях, а также в клинических применениях .

Lin et al. выяснили, может ли синхронизация клеточного цикла влиять на относительное использование этих двух путей восстановления, чтобы определить условия, которые приводят к более эффективному HDR.Авторы проверили, может ли обратимая обработка клеток лекарствами, блокирующими клетки в фазах клеточного цикла S и поздних G2, увеличить скорость HDR в сочетании с синхронизированной доставкой рибонуклеопротеиновых комплексов Cas9-sgRNA (RNP) и различных экзогенных ДНК-матриц. Используя шесть фармакологических агентов и сужая список до двух (нокодазол, который, как сообщается, блокирует клетки в поздней фазе G2 / M, и афидиколин, который блокирует клетки в фазе S), авторы убедительно демонстрируют, что эти методы лечения в сочетании со временными Доставка Cas9 RNPs и экзогенных ДНК-матриц значительно увеличивала скорость HDR по двум локусам в двух разных типах клеток. Важно отметить, что они также убедительно демонстрируют, что нецелевое редактирование незначительно при использовании этого подхода .

Это значительное расширение предыдущих усилий этой группы, направленных на создание системы редактирования генома CRISPR / Cas9 в клетках млекопитающих для индукции как NHEJ, так и HDR в определенных геномных локусах ( Jinek et al., 2013 ). Возможность увеличения скорости HDR за счет синхронизации клеток в сочетании с синхронизацией доставки Cas9 RNP, несомненно, окажет значительное влияние в области редактирования генома, особенно для приложений, нацеленных на разработку конкретных представляющих интерес мутаций в различных типах клеток, таких как ES- и iPS-клетки человека .

Основные комментарии:

1) Ключевое наблюдение здесь заключается в том, что клетки, обработанные и высвобождаемые различными химическими ингибиторами развития клеточного цикла, подвергаются повышенному CRISPR / Cas9-опосредованному HDR по сравнению с необработанными клетками. Хотя это ясно показано, эффекты клеточного цикла, связанные с этим лечением, недостаточно хорошо изучены. Хотя используемые лекарства обычно используются в этой области, важно охарактеризовать их в конкретных исследуемых клеточных линиях.Авторы показывают анализ клеточного цикла клеток HEK293T в Рисунок 1 — приложение к рисунку 1 . Однако для лечения как нокодазолом, так и афидиколином данные, по-видимому, показывают значимые пики 2n, а также 4n. Таким образом, неясно, какая фаза клеточного цикла может быть связана с повышенным HDR, наблюдаемым после освобождения от этих обработок. Что касается экспериментов с человеческими ES-клетками H9, в которых использовалась комбинация нокодазола и афидиколина, анализ клеточного цикла вообще не показан.Важно решить обе эти проблемы до публикации .

Теперь мы включили полную панель анализа клеточного цикла для HEK293T, клеток hES и недавно добавленных первичных неонатальных фибробластов на рис. 1 — рисунок в приложении 1. Мы также выполнили анализ щелочной фосфатазы, чтобы убедиться, что клетки hES остаются недифференцированными после синхронизации. Что касается блока клеточного цикла нокодазола HEK293T, мы переделали анализ клеточного цикла и обнаружили, что действительно большинство клеток имеют 4N.То же самое верно для первичных фибробластов и клеток чЭС. Некоторые клетки 4N HEK293T проскальзывают через контрольную точку M-фазы и инициируют S-фазу. Этот феномен митотического проскальзывания наблюдался ранее в различных клеточных линиях, обработанных нокодазолом и другими антимикротрубочковыми препаратами (Riffell et al., 2009). Никакого митотического проскальзывания не наблюдалось при обработке нокодазолом первичных фибробластов или hES-клеток, которые имеют интактную регуляцию контрольной точки клеточного цикла.

2) За исключением экспериментов, представленных в Рисунок 2C с использованием клеток H9, большинство экспериментов проводилось с клетками HEK293T, которые легко трансфицируются методами нуклеофекции. Важно отметить, что частота HDR, о которой сообщалось, была значительно ниже в клетках H9, обработанных лекарством, по сравнению с клетками HEK293T, обработанными лекарством. Более того, индукция HDR в ES-клетках потребовала модификации протокола, чтобы включить 16-часовой импульс нокодазола с последующим 3-часовым импульсом афидиколина перед нуклеофекцией Cas9 RNP. Интересно, насколько эти методы будут обобщены на другие типы клеток. Следовательно, рукопись будет усилена добавлением анализа панели клеточных линий .

Мы согласны с тем, что анализ других клеточных линий важен, чтобы показать, что этот метод широко применим. Теперь мы включаем данные для первичных неонатальных фибробластов, типа клеток с низкой эффективностью трансфекции. В этом типе клеток мы наблюдали улучшенное общее редактирование и HDR с синхронизацией афидиколином, в отличие от усиления при лечении нокодазолом, как наблюдалось в клетках HEK293T и hES. Хотя эти результаты указывают на некоторую вариабельность в зависимости от типа клеток, сама процедура синхронизации клеточного цикла часто не может быть обобщена для разных типов клеток. Из-за различий в физиологии, скорости роста и продолжительности фаз клеточного цикла необходимо эмпирически определить и оптимизировать протокол синхронизации. Тем не менее, представленные здесь результаты подтверждают возможность своевременной доставки Cas9 RNPs для повышения скорости сайт-специфичного редактирования генома посредством гомологически-направленной репарации.

3) Авторы должны установить исходную эффективность нуклеофекции для различных тестируемых клеточных линий. Это поможет выяснить, может ли эффективность нуклеофекции быть фактором, способствующим различию, наблюдаемому между клетками HEK293T и клетками H9 .

Хотя эффективность нуклеофекции, вероятно, влияет на наблюдаемые различия в Cas9-обеспечиваемом редактировании генома, мы не смогли определить исходную эффективность нуклеофекции RNP для этих клеток.

4) Неясно, тестировались ли другие ингибиторы клеточного цикла, кроме нокодазола, в Рисунок 1 — приложение к рисунку 1 на ES-клетках. Как минимум, этот момент следует прояснить. Если они не были протестированы, по какой причине?

Мы согласны с рецензентом и теперь прояснили рукопись, включив утверждение о синхронизации клеточного цикла в клетках hES.В предварительных экспериментах мы тестировали клетки hES с шестью ингибиторами клеточного цикла. Результаты были неутешительными: только нокодазол показал улучшение в общем редактировании, но HDR не был обнаружен. Поэтому мы приняли метод, описанный Pauklin и Vallier (2013), в котором клетки hES последовательно обрабатывали сначала нокодазолом в течение 16 часов, а затем импульсами афидиколином в течение 3 часов до нуклеофекции. С этой модификацией наблюдались более высокие уровни общего редактирования и обнаруживаемого HDR.

5) Учитывая интерес к эффективности нацеливания как функции целевых локусов, было бы полезно расширить это исследование на более чем два локуса, протестированных здесь .

Теперь мы включаем новые данные, показывающие эффективность редактирования гена CXCR4 в клетках HEK293T. Синхронизация с нокодазолом привела к значительному повышению эффективности HDR. Подобно EMX1 и DYRK1, наиболее значительное увеличение наблюдалось для клеток, получающих меньшее количество Cas9 RNP. В этом случае синхронизация нокодазола дала 27% HDR при 10 пмоль Cas9 RNP. Для сопоставимого уровня HDR в несинхронизированных клетках потребуется 100 пмоль RNP. Повышение HDR в трех разных локусах демонстрирует, что эта своевременная доставка Cas9 RNP является широко применимым методом в клетках HEK293T.

6) В Рисунок 3B , авторы показывают, что добавление афидиколина после высвобождения из блока нокодазола снижает эффективность HDR в клетках HEK293T, предполагая, что вступление в S-фазу может потребоваться для эффективной HRD-опосредованной репарации. Они должны показать, что это комбинированное лечение действительно блокировало вход в S-фазу в этих экспериментах, особенно с учетом нечетных профилей клеточного цикла, показанных в Рисунок 1 — приложение к рисунку 1 . Кроме того, как этот вывод согласуется с повышенной эффективностью HDR в ES-клетках, обработанных этой же комбинацией, по сравнению с одним нокодазолом?

Эксперименты на третьей панели рис. 3B и клетки hES включали два разных условия.Мы благодарим рецензента за указание на путаницу, и теперь мы прояснили этот момент в рукописи.

На фиг. 3B, третья панель, клетки HEK293T были синхронизированы с нокодазолом до нуклеофекции. Сразу после нуклеофекции в среду для роста добавляли одну дозу афидиколина, чтобы предотвратить переход трансфицированных клеток в S-фазу. Цель заключалась в том, чтобы снизить эффективность HDR, поскольку считается, что путь HDR наиболее активен во время фазы S. Мы обозначили это однократное добавление афидиколина «блоком афидиколина» на рисунке 3В, в отличие от стандартной процедуры синхронизации афидиколина, используемой в других местах рукописи.Стандартная процедура синхронизации афидиколина включает обработку клеток лекарством в течение 17 часов, высвобождение клеток в течение 7-8 часов и затем повторную обработку клеток еще в течение 17 часов. Такая последовательная обработка не соответствует нашей экспериментальной схеме, поскольку клетки собирали через 24 часа после нуклеофекции для анализа. Целью этого эксперимента было продемонстрировать, что афидиколин снижает эффективность HDR, вместо того, чтобы пытаться полностью отменить HDR. Наши результаты на второй и третьей панелях рис. 3B показывают, что частоты HDR действительно были значительно уменьшены.

Клетки hES на фиг. 3B обрабатывали по-разному. Как описано в ответе выше, мы изменили стандартную процедуру синхронизации с одним лекарством в экспериментах HEK293T, чтобы включить два лекарства для эффективной синхронизации. Мы использовали метод, описанный Pauklin и Vallier (2013), в котором клетки hES последовательно обрабатывали сначала нокодазолом в течение 16 часов, а затем импульсами афидиколином в течение 3 часов до нуклеофекции. После нуклеофекции клетки hES выращивали в среде, не содержащей ингибиторов.

7) Авторы утверждают в Обсуждении, что их подход нуклеофекции Cas9 RNPs приводит к более высокой жизнеспособности клеток, чем методы, основанные на трансфекции ДНК. Однако никаких данных, подтверждающих это утверждение , не показано.

Мы процитировали две опубликованные статьи (Kim et al., 2014 и Zuris et al., 2014), в обеих из которых изучалась жизнеспособность клеток между методами трансфекции на основе ДНК и RNP.

https://doi.org/10.7554/eLife.04766.010

Результаты — Delta Timing Group

19-20 марта Tiger Track Classic — Оберн Живые результаты 19-20 марта Bob Hayes HS Invitational — Raines HS — Джексонвилл, Флорида Живые результаты 19 марта Bob Hayes MS Invitational — Raines HS — Джексонвилл, Флорида Полученные результаты 27 марта Оле Мисс Классик — Оле Мисс Живые результаты 3 апреля Baylor Invitational — Бейлор Живые результаты 3 апреля Битва на Байу — LSU Живые результаты 9-10 апреля Джо Уокер Классик — Оле Мисс Живые результаты 16-17 апреля War Eagle Invitational — Оберн Живые результаты 16-17 апреля Майкл Джонсон Invitational — Бэйлор Живые результаты 17 апреля Ботинки Garland Invitational — LSU Живые результаты 23-24 апреля Джон Джейкобс инвайт — Оклахома Живые результаты 6-8 мая LHSAA Открытый чемпионат — LSU Живые результаты 7-8 мая Чемпионат OK HS 3A-4A — Оклахома Живые результаты 7-9 мая Horizon League Outdoors — Янгстаун Стэйт Живые результаты 15 мая OK HS 6A State Meet — Оклахома Живые результаты 27-29 мая NCAA Div III Открытый чемпионат — Северная Каролина A&T Живые результаты

Michiana Timing | Специалисты по таймингу

Дом

Кросс-кантри в режиме реального времени и лента событий выбора трека для текущего события на курсе во время хронометрированных событий с чипом или на треке для событий трека могут иметь полные результаты. com или на timerhub:

mt1.timerhub.com/xc
или
mt2.timerhub.com/xc

Результаты

по бегу по пересеченной местности должны быть доступны на сайте Athletic.net или michianatiming.com/live вскоре после каждого соревнования.

Лучше всего просматривать наши результаты легкой атлетики на мобильном устройстве на сайте «mtresults.com».

финишная черта малых соревнований

Приближается отличная подборка летних развлечений! Ознакомьтесь с нашим календарем или зарегистрируйтесь на одно из мероприятий.

Michiana Timing предоставляет полный спектр услуг по хронометражу для множества событий, включая:

  • Легкая атлетика: полностью автоматизированные системы хронометража от FinishLynx
  • Cross Country — Small: система ручного отжима нагрудника или браслета по доступной цене
  • Cross Country — Medium / Large: FinishLynx FAT System с видео IdentiLynx или Chip Timing с результатами в реальном времени
  • Road Race / Road Run: система хронометража нагрудников с результатами в реальном времени, мы предлагаем варианты без ковриков, на которые можно споткнуться, одноразовые бирки на нагрудниках или многоразовые чипы для экономичного и экологически безопасного директора гонки
  • Bike Racing: система RFID с результатами в реальном времени, чипы могут быть размещены на шлеме, велосипедной пластине или раме
  • Triathlons: система чипов на лодыжке, полностью погружная, с переходными разделениями и результатами.
  • Mud Runs и другие серии приключенческих гонок: мы предлагаем множество вариантов чипов с результатами в реальном времени.

Наши основные зоны обслуживания — это запад, центральный и северный Мичиган, северная и средняя Индиана, северный Иллинойс. Наши основные офисы расположены в Гранд-Рапидс, штат Мичиган, и в Саут-Бенд, штат Индиана. Мы регулярно работаем в других местах, в том числе недавно в Вашингтоне, Кентукки и Висконсине. Мы поедем куда угодно, если ваша потребность в услугах поддерживает наше участие в вашем мероприятии.

У нас есть многолетний опыт организации мероприятий в средней и старшей школе, университетском, общественном и открытом уровнях. Наши цены всегда конкурентоспособны на предоставляемые услуги, но дело не в цене, а в обслуживании!

Хотите обсудить возможность быстрого предоставления точных результатов на вашем мероприятии? Позвоните или напишите сегодня.
Телефон: 616-821-3156
Эл. Почта: [email protected]

alexxlab

E-mail : alexxlab@gmail.com

Submit A Comment

Must be fill required * marked fields.

:*
:*